Все живые организмы — сюрприз, сюрприз — умеют размножаться. Полезные для наших садов и огородов грибки и бактерии, на основе которых создают биопрепараты, не исключение. В хороших условиях, при достатке питания они будут активно увеличивать численность и завоевывать пространства. А это значит, что купив одну (не всегда дешевую) упаковку с биопрепаратом, есть возможность получить практически бесконечный поток полезных микроорганизмов.
Хотите заселить свой огород грибками, подавляющими и пожирающими вредителей и патогены? Например, триходермой, метаризиумом или боверией? А как насчет того, чтобы усилить действие любимого нашего «Фитоспорина»? Давайте попробуем провести настоящий микробиологический эксперимент и вырастить необходимые бактерии и грибки в домашних условиях!
Мы начинаем цикл статей о выращивании, размножении и активации биопрепаратов, чтобы научиться правильно и с наибольшей эффективностью применять их в огороде или в саду. Из сегодняшней статьи вы узнаете: какие микроорганизмы приносят пользу садоводу, как обеспечить чистоту эксперимента и в каких условиях предпочитают жить и размножаться грибки и бактерии. Будет интересно.
Сразу оговоримся, ленивый подход «без забот и хлопот» в данном случае не сработает. Самостоятельно вырастить живой организм (даже если он — бактерия) нелегко по нескольким причинам. Во-первых, далеко не в каждом покупном биопрепарате действительно присутствует живой материал. Недобросовестные производители, неправильное хранение или транспортировка — и вместо рабочего препарата у нас в руках «пустышка». Во-вторых, биопрепараты могут быть «загрязнены» другими культурами. Скажем, в одном пакетике с триходермой будет и никому не нужный гриб аспергилл, который в процессе выращивания запросто может триходерму подавить. Наконец, мы сами можем плохо простерилизовать баночки и вместо метаризиума вырастить плесень.
Поэтому нужно знать, как выглядят колонии тех или иных культур, как они растут, как отличить полезный гриб от бесполезного и что делать, чтобы выращенная нами культура была максимально «чистой». Всему можно научиться, читая и изучая различные источники информации, анализируя чужой опыт и получая свой собственный. Вы еще не передумали разводить микроорганизмы? Тогда начинаем!
Кто нам нужен: какие биопрепараты стоит вырастить
Начнем с самого простого: не все средства с пометкой «Био» содержат живые культуры. Например, всем известный биоинсектицид «Фитоверм» и его аналоги созданы на основе продуктов жизнедеятельности грибов. Живых спор и мицелия грибов в этом препарате нет.
Противобактериальный биопрепарат «Фитолавин» содержит комплекс стрептотрициновых антибиотиков, продуцируемых почвенными грибами, но не сами грибы.
Всевозможные биостимуляторы, изготовленные на основе хвойных экстрактов, хлорофилла, женьшеня и другого растительного сырья, для наших целей, как вы уже догадались, тоже не годятся.
Развести в домашних условиях получится только те биологические препараты, которые содержат живые штаммы бактерий или споро-мицелиевую массу грибка. Вот несколько примеров:
- Trichoderma harzianum и Trichoderma viride — грибки рода Триходерма, поглощающие растительные остатки вместе с мицелием других грибов (в том числе и патогенных). Выпускается в виде препаратов «Триходермин», «Триходерма Вериде», «Глиокладин», «Трихоцин» и других.
- Metarhizium anisopliae — «хищный» энтомопатогенный гриб, паразитирующий на насекомых-вредителях, живущих или зимующих в почве. Например, на проволочнике, колорадском жуке, личинке майского жука, медведке, паутинном клеще и прочих. Содержат гриб-метаризиум такие препараты, как: «Метаризин», «Почвощит», «Микорад Инсекто 1.1.».
- Beauvéria bassiána — еще один энтомопатогенный грибок, заражающий вредителей сельскохозяйственных культур, обитающих на самих растениях: долгоносиков, белокрылку, мух, клещей и клопов разных видов. Споры гриба Боверия являются основой биопрепаратов «Боверин», «Биослип БВ», «Зеленый барьер», «Микорад Инсекто 1.2», «Легкая победа», «Боверия Бассиана».
- Bacillus subtilis — различные штаммы сенной палочки, хорошо известной огородникам бактерии, подавляющей рост патогенных грибков. На основе сенной палочки существует множество препаратов, например: «Фитоспорин-М», «Алирин-Б», «Бактерра», «Бактофит», «БисолбиСан», «Бисолбицид», «Споробактерин», «Гамаир», «Фитобактерин+» и другие.
- Bacillus thuringiensis — бактерии, нарушающие пищеварительный процесс листогрызущих насекомых, тем самым вызывая их гибель. Содержатся в биопрепаратах «Битоксибациллин» и «Лепидоцид».
- Paecilomyces lilacinus — хищный гриб, используется в борьбе с нематодами. Основа препарата «Микорад Nemato 3.1».
- Lecanicillium lecanii — энтомопатогенный гриб, применяемый для защиты растений от сосущих насекомых и клещей. Является активным компонентом биопрепаратов «Биоверт», «Микорад Инсекто 1.3».
- Pseudomonas fluorescens и Pseudomonas aureofaciens- несколько штаммов бактерий, выделяющие вещества фунгицидного, антибиотического и стимулирующего действия. На основе псевдомонад есть несколько препаратов («Гулливер», «Псевдобактерин», «Бинорам», «Ризоплан», «Планриз»), но их довольно трудно найти в продаже.
Мы перечислили только основные микроорганизмы и содержащие их биологические препараты. На самом деле полезных грибов и бактерий гораздо больше, и некоторые увлеченные огородники разводят не самые популярные микроорганизмы и даже выделяют их из естественных условий обитания. Нам же для начала более чем достаточно наименований из списка.
Основы основ: общие требования к эксперименту
Прежде чем приступать к приготовлению биопрепаратов, нужно усвоить несколько базовых правил, без соблюдения которых наш эксперимент обречен.
Правило первое: стерильность
Тем, кто закатывает банки на зиму, тема знакома. Банки, бутылки, мерные стаканчики и ложечки должны быть тщательно вымыты с мылом и продезинфицированы любым удобным способом. Банки и бутылки можно залить на ночь раствором «Белизны». Другой вариант: выдержать над паром 10-30 минут или прогреть в духовке/микроволновке. Инструменты протираем спиртом или кипятим. Питательную среду, в которую мы будем заселять бактерии или грибы, тоже нужно простерилизовать, об этом мы еще не раз напомним.
Чем лучше мы продезинфицируем инвентарь, тем меньше риск вырастить постороннюю бактерию или грибок вместо желаемой.
Правило второе: температура и освещенность
Все микроорганизмы, которые подходят для наших целей, размножаются при комнатной температуре или чуть выше (+25-28°С). Триходерма может расти на свету, метаризиум и боверию лучше выращивать в темноте. Мы советуем все-таки держать баночки с препаратами в темном и теплом месте.
На свету прекрасно и быстро развивается зеленая микроводоросль хлорелла, часто используемая садоводами в качестве натуральной органической подкормки.
Правило третье: доступ кислорода
Большинство полезных микроорганизмов, в том числе сенная палочка и триходерма, аэробные. Это значит, что для жизни им нужен кислород. Поэтому тару никогда не заполняют питательным субстратом доверху, оставляя пространство для воздухообмена.
На чем выращивать будем: питательные среды для грибов и бактерий
Существует множество вариаций питательных сред для домашнего культивирования биологических препаратов. Одни больше подходят для бактерий, другие — для грибов. В зависимости от того, сколько питательных веществ содержит та или иная среда, она считается богатой или бедной. На богатых средах грибы и бактерии растут быстрее, но и конкурирующие загрязнители (вроде плесени или дрожжей) тоже не дремлют. На бедных средах все растет медленно, зато при наличии посторонних микроорганизмов выше шансы заметить и отсадить в другую емкость чистую культуру.
Для тех, кто только начинает осваивать самостоятельное приготовление биопрепаратов, рекомендуют использовать бедные среды. И постепенно, по мере приобретения опыта переходить на богатые.
Выращивать микроорганизмы (особенно грибные колонии триходермы) можно практически на всем. Крахмал, кофейная гуща или остатки чайной заварки могут стать отличной питательной средой. Мы рассмотрим самые распространенные, базовые варианты и рецепты приготовления сред, а вы потом в своих экспериментах можете дать волю фантазии.
Жидкостные среды
Жидкостные среды можно назвать универсальными, поскольку на них можно выращивать как бактерии, так и грибки. При этом бактерии предпочитают более щелочные растворы, а грибки — подкисленные.
Вот несколько популярных питательных смесей для размножения микроорганизмов:
- На 1 литр воды: 10 граммов сахара (глюкозы или фруктозы), щепотку соли и любое жидкое комплексное минеральное удобрение в количестве, указанном в инструкции. Если в инструкции на 10 литров воды нужно 30 миллилитров удобрения, значит на литр нам потребуется всего лишь 3 миллилитра. Все компоненты необходимо смешать и простерилизовать любым способом не менее 20 минут. Получается базовая бедная среда, в которой можно вырастить практически все, что нужно. Ну может быть, для боверии стоит приготовить более богатую среду.
- На 1 литр воды: 15-20 граммов сахара, 1 грамм комплексного минерального удобрения без гуматов, 20 граммов прессованных или 15 граммов сухих дрожжей. Все смешать и простерилизовать. Эта среда богата питательными веществами за счет неактивных дрожжей — при кипячении сами дрожжевые грибки погибнут, но в растворе останутся аминокислоты.
- Отвариваем 100-200 граммов любых овощей (картофель, тыква, капуста, кабачок), процеживаем и на один литр овощного бульона добавляем 1 чайную ложку соли и 10-15 граммов сахара. Не забываем прокипятить полученную среду.
Зерновые среды
Для выращивания грибковых препаратов часто используется зерно или крупа. Овес, перловка, пшено, отруби, кукурузная или пшеничная каша служат прекрасным источником питания для полезных грибов. Чаще всего в качестве питательной среды используется перловка — дешево и сердито. Единственный минус зерновых — на них может жить большое количество «загрязнителей». Поэтому крупу необходимо промыть, замочить на 24 часа, слить всю воду, а затем в течение 10 минут пропарить в микроволновке или духовке.
Перлит и цеолит
Перлит и цеолит — это минеральные пористые материалы, которые отлично впитывают влагу. Перлит продается в садовых магазинах — возможно, вы добавляете его в грунт для рассады в качестве разрыхлителя. Из цеолита делают наполнитель для кошачьих туалетов, найти его в продаже не составит труда.
Чтобы приготовить питательный субстрат для грибка, нам понадобится перлит (цеолит) и любая жидкая среда, о которых мы рассказывали выше. Вместо жидкой среды можно использовать отвар от макарон или разведенное молоко (молоко разбавить водой 1:1, прокипятить, охладить).
Стерильную банку на 800 миллилитров наполовину или на 2/3 заполняем перлитом, вливаем 1,5 стакана простерилизованного питательного раствора или отвара макарон или разбавленного молока. Встряхиваем содержимое — на дне банки должен быть примерно сантиметр отстоявшейся жидкости. Затем охлаждаем субстрат до комнатной температуры. Готово, можно засевать гриб.
Агаризованные среды
Питательные среды с добавлением агара — это вариант для продвинутых экспериментаторов с микроорганизмами. В принципе ничего супер-сложного в приготовлении агаровых сред нет, однако их чаще всего используют при высевании культур на чашки петри. Например, для проверки своего «доморощенного» биопрепарата — а сможет ли он какую-нибудь гусеницу по правде заразить? Питательных сред с агаром тоже можно приготовить великое множество. Предлагаем вам несколько вариантов:
- 1 литр воды, 0,5 грамма лимонной кислоты, 20 граммов сахара, 2 чайные ложки мёда, щепотка соли, жидкое минеральное удобрение по инструкции, 15 граммов агара. Подходит для грибов.
- В одном литре воды отваривают 200 граммов мелко нарезанного картофеля. Отвар процеживают и доводят объем до литра кипяченой водой. Добавляют щепотку соли, 20 граммов сахара или глюкозы и 15-20 граммов агара.
- 1 литр кипяченой воды, жидкое минеральное удобрение по инструкции, 20 граммов глюкозы, 30 граммов агара.
Готовятся агаризованные субстраты так: в стерильную банку или бутылку заливаем воду и добавляем все остальные компоненты, включая агар. Ставим банку с приоткрытой крышкой в микроволновку и доводим до кипения. Аккуратно вынимаем, закрываем крышку и взбалтываем смесь, чтобы подрастворить осевший агар. Эту процедуру повторяем еще раз. За два взбалтывания-перемешивания все компоненты хорошо растворятся. После чего необходимо 15-20 минут кипятить смесь в микроволновке на минимальной мощности.
Стерилизовать среду можно и в скороварке, мультиварке или в кастрюле с водой — так же как стерилизуются консервы на зиму. После стерилизации агаровой среде нужно немного остыть. Не до комнатной температуры, а до того момента, когда стеклянную банку можно будет спокойно взять в руку без прихватки. Среду такой температуры можно разливать по чашкам петри (конечно, предварительно продезинфицированным). Заливаем слоем в 1,5 сантиметра.
Лишнюю агаровую среду хранят в холодильнике. Позже, по мере надобности ее разогревают в микроволновке и разливают по чашкам или баночкам.
Чтобы избежать бактериального заражения среды при выращивании грибков, в смесь добавляют антибиотик, например «Левомицетин» (500 миллиграмм на литр). Он выдерживает кипячение, поэтому его можно закладывать вместе с остальными компонентами. При выращивании бактерий, наоборот, будут мешать дрожжи и другие грибы, рост которых можно подавить при помощи противогрибковых лекарств, к примеру «Флуконазола» (2 капсулы на литр). Этот препарат добавляют в агаровую среду уже после остывания.
Кто есть кто: как выглядят полезные микроорганизмы и с чем их можно перепутать
Бывает так, что даже при тщательной стерилизации у нас вырастает совсем не то, чего хотелось. Особенно, если материал мы брали из покупных биопрепаратов. Как понять, какой гриб у нас размножился? Как определить, что в нашем растворе живут бактерии, а не дрожжи? В домашних условиях мы можем определить микроорганизм по внешнему виду и по запаху. А если у вашего ребенка есть школьный микроскоп, думаем, вы вместе захотите рассмотреть своих микропитомцев поближе.
Как выглядит триходерма
У триходермы мицелий (тонкие ниточки грибницы) белого цвета. Поэтому в начале роста среда будет покрыта белым налетом. Когда гриб приступает к спороношению, триходерма приобретает зеленоватый оттенок. Триходерма харцианум становится прямо изумрудной, темно-зеленой; триходерма вериде — светло-зеленой или желтовато-зеленой.
Проще всего спутать триходерму с другим грибком — пенициллом. Этот всем знакомый плесневелый гриб обитает повсеместно, и запросто может оказаться в одном пакетике с триходермой. Однако пеницилл более сизого, сероватого оттенка. Мицелий у него более плотный и растет островками. Триходерма же обычно растет разреженно, занимает все отведенное пространство. И мицелий у нее более пушистый. Пахнут они тоже по-разному. Запах пеницилла отдает затхлостью, подвалом, плесенью. Триходерма пахнет грибами, иногда с нотками кокоса.
Под микроскопом триходерма выглядит так:
Как выглядит метаризиум
Цвет у гриба метаризиума может быть разный. Он зависит как от среды обитания гриба, так и от стадии его развития. Сначала метаризиум белый. Затем с переходом к спороношению цвет грибка меняется на зеленовато-серый, зеленовато-бурый, оливковый или горчичный.
Из-за того, что метаризиуму присущи желтые оттенки, его легко спутать с другим похожим грибом под названием аспергил желтый. Он может оказаться в упаковке с биопрепаратом или вместе с метаризиумом, или вместо него. Чем же они отличаются?
Как правило, цвет у аспергила более желтый. При выращивании на чашке петри колонии метаризиума более плотные, похожие на корку, и если попробовать подцепить кусочек, споромицелиевая масса метаризиума будет крошиться и ломаться. Аспергил более рыхлый, никакой корки он не образует. Если провести по колонии спицей или шпажкой, в ней образуются бороздки, как в песке или порошке. Вот как аспергилл растет на чашках петри:
Под микроскопом мицелий и споры аспергила располагаются словно цветы на ножках, их называют «одуванчиками»:
А метаризиум под микроскопом выглядит иначе. Его споры похожи на сцепленные между собой рисинки:
Если вы хотите досконально разобраться во всех отличиях аспергила от метаризиума, посмотрите это видео:
На канале Артема Тяптина качественный и интересный материал о самостоятельном выращивании биопрепаратов, много экспериментов и полезных советов для начинающих. Рекомендуем!
Как выглядит боверия
Если триходерма и метаризиум отличаются склонностью к зеленоватым оттенкам, то боверия — совсем другое дело. Она обычно чисто белая, как снег или зефир. На некоторых средах дает слегка желтоватый оттенок. Может расти пышно, образуя небольшие комочки, похожие на вату. Может быть и более приземистой, напоминающей просыпанную муку. Боверия сильно пылит при прикосновении, поэтому при работе с ней советуют надевать маску.
Под микроскопом боверия выглядит таким образом:
О том, как растет и выглядит боверия на разных средах, хорошо и подробно рассказывает Иван Русских. Его канал мы тоже весьма и весьма рекомендуем всем, кто загорелся идеей самостоятельного разведения биопрепаратов:
Оцениваем качество бактериальных препаратов
Бактериальные препараты готовятся сложнее, но быстрее грибных. Если грибам для размножения требуется 7-10 дней, а иногда и больше, то биопрепараты на основе бактерий можно применять через 1-3 суток. Но! Грибы мы хотя бы можем рассмотреть невооруженным глазом, а вот с бактериями этот номер не пройдет — слишком малюсенькие. Как же тогда понять, получился у нас бактериальный препарат или не получился? Будем оценивать качество по косвенным признакам.
Критерии качества у бактериальных препаратов следующие:
- Раствор должен быть мутным, похожим по внешнему виду и цвету на сильно разбавленное молоко. Хотя оттенок может отличатся от молочно-кремового — зависит от изначального цвета среды.
- На поверхности жидкости может образоваться склизская пленочка (наподобие чайного гриба). Это соединившиеся клетки множества бактерий образовали колонию.
- В жидкой среде видны белые точки или хлопья. Это тоже бактериальные колонии.
- В растворе не должно быть газообразования (пузырьков или бурления) — это признаки дрожжевого брожения.
Запах у качественного бактериального препарата слегка кисловатый, квасной. Сенная палочка может давать легкий запах аммиака. Спиртовой, напоминающий брагу запах означает, что вместо бактерии мы вырастили дрожжи.
Теперь мы с вами знаем, в каких биопрепаратах есть смысл искать «живое начало», как выглядят полезные для наших огородов микроорганизмы и в каких условиях они быстро размножаются. В следующих статьях мы подробно рассмотрим процесс выращивания грибных и бактериальных культур с их особенностями и нюансами, разберемся, какие компоненты питательных субстратов предпочтительнее для того или иного микроорганизма. Также выясним, каким образом и в каких количествах следует применять приготовленные «живые» препараты в огороде. А пока… желаем вам успехов и больших урожаев!